lin22307
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 Wysłany: Sob 8:23, 19 Mar 2011 Temat postu: L-肌肽预处ச |
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L-肌肽预处理对小鼠缺血再灌注心肌的保护作用
ellXUJing，TIANXiang―qin，LIXin-juan，etal(1．MedicalResearchCenterofXinxiangMedicalCollege，Xinxiang453003，China；2．DepartmentofPhysiologyandNeurobiology，XinxiangMedicalCollege，Xinxiang453003，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatethepreparativemethodofuhramierocutoftheculturecel1．MethodsPrimaryculturessampleobtainedfromlivercancerpatientswererandomlydividedintoconventiongroupandimprovementgroup．Theultrastructuralcharacteristicoftheculturecellswerecomparedbetweentwogroups．ResultsFuzzycellstructure，alargenumberofaqtocytolysis，shrinkageandsqueezingphenomenonwereobservedinconventiongroup，butinimprovementgroup，thecellularuhramicrostructureswereclearandvisible，theaqtocytolysisandshrinkagephenomenonwererare．ConclusionTheimprovedmethodwhichcouldclearlyshowthecellularuhramicrostructuresisagoodmethodofsamplepreparationofcellculture．Keywords：cellculture；uhramicrocut；preparativemethod透射电镜观察培养细胞是较常见的形态学研究方法，培养细胞超薄切片的制备是关键技术。培养细胞数量少且培养细胞方式的多样化，给样品制备带来一定的难度。作者在常规制备方法的基础上进行改进，减少了超微结构出现人为的改变及假象等，使实验结果更加真实可靠，现报道如下。l材料与方法1．1材料细胞来源于肝癌患者手术标本，37℃，体积分数5％CO培养72h后用胰蛋白酶消化而得；收稿日期：2008―10一l7作者简介：徐晶(1977一)，女，河南新乡人，学士，助理实验师，研究方向：电镜切片技术。通讯作者：蔡新华(1965一)，女，河南新乡人，硕士，教授，研究方向：细胞超微结构形态研究。LeicaEMUC6rt型超薄切片，日立H-7500透射电镜。1．2方法1．2．1常规组参照文献方法[1-2]，胰蛋白酶消化后的细胞倒人尖底离心管，以800r·min离心5min成团，弃上清液，用针尖贴离心管壁轻轻触动离心团块，加入体积分数2．5％的戊二醛固定液4oC冰箱内固定3h；弃上清液，将细胞团块移入洗净的青霉素小瓶内，pH7．4磷酸缓冲液漂洗4次，每次2h以上，置人体积分数1％的四氧化锇，于4oC冰箱内后固定90min；pH7．4缓冲液洗3次，每次15min；梯度丙酮脱水，1：1丙酮Epon812浸透4h，1：aN酮Epon812浸透4h以上；包埋：橡胶包埋板包埋，如有冲散的细胞小团块，用牙签移出一并包埋于一处，常规温箱内聚合。每次换液均采用传统
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